【脱脂・脱灰】病理の脱脂と脱灰の目的・原理・液の種類をわかりやすく解説！

ぜぶら

今回は脱脂と脱灰について。
それぞれが何なのか、そしてどうやって行うのかをポイントを絞って解説していきます。

この記事の著者

どっとぜぶら

細胞検査士
臨床検査技師
医学博士

Profile

・細胞検査士試験 １発合格
・12月からの勉強でMT国試150点

少しでも多くのMT, CT学習者の役に立ちたいと思いSNSなどで情報発信中。
テーマは【勉強ができない人はいない。やり方次第で誰でもできる！】
細胞診過去問解説集や病理の国試解説集を出しました。

XInstagramYouTube

脱脂は脂肪を除去する作業

パラフィン浸透までの過程でアルコールやキシレンを通すため、微量な脂質は除去され問題となりません。

それでは除去できないくらい脂肪を多く含むものが存在します。

このような組織に対して脱脂を行います。

脱脂で覚えること２つ

脱脂の操作では以下の２つを覚える必要があります。

1. どのタイミングで行うか
2. 何を使って行うか

❶脱脂は固定、切り出し後、脱灰前に行う

脱脂に使われる試薬５つ

これらを混合して使うこともあります。

標本作製過程でエタノールやキシレンを使用するため、すべての検体で少し脱脂されます。

脱灰とは沈着したカルシウムを除去すること

骨や歯などはカルシウムが沈着し、石灰化と呼ばれる現象で硬くなります。

石灰化の詳細はこちら

【脱脂・脱灰】病理の脱脂と脱灰の目的・原理・液の種類をわかりやすく解説！

疾患でも石灰化を起こすものがあります。
腫瘍で見られる石灰化物は砂粒体とも呼ばれます。

組織を観察するためには薄切をする必要がありますが、硬い組織は軟らかくしないと薄切できません。
薄切のイラスト解説はこちら

石灰化物からカルシウムを除去して軟らかくする作業が脱灰です。

脱灰で覚えること５つ

1. 脱灰のタイミング
2. 酸脱灰液の種類と特徴
3. EDTA液の特徴
4. 脱灰の影響
5. 脱灰中と後の注意点

①脱灰のタイミング

脱灰をする前に十分な固定と十分な脱脂が必要です。
そのため固定・脱脂の後に脱灰を行います。

６種類の脱灰液

1. 酸脱灰液
   • 無機酸
     • 塩酸
     • 硝酸
   • 有機酸
     • ギ酸
     • トリクロロ酢酸
   • 迅速脱灰
     • プランクリクロ
       （塩酸＋ギ酸＋塩化アルミニウム）
2. EDTA液

５つの酸脱灰液

酸脱灰液は５種類あり、無機酸、有機酸、迅速脱灰の３つに大別できる。

ぜぶら

それぞれに含まれる液と特徴を覚えよう！

エチレンジアミン四酢酸液(EDTA液)

EDTAとは？

EDTAは以下の２種類がある。

1. EDTA・２Na
   アンモニア水 or 水酸化ナトリウムを含む
2. EDTA・４Na
   塩酸 or クエン酸を含む

脱灰は組織の構造、染色、免疫染色に悪影響

脱灰は酸などを使うため脱灰が長い(強力)と組織に悪影響を及ぼします。

染色性が変化する

HE染色では以下の２つの変化が生じる。

1. 核のヘマトキシリンが染色低下
2. 細胞質のエオジンが濃染

組織が膨化する

組織が膨化したり溶解したりする。

抗原性が減弱する

脱灰によって抗原性が減弱するため免疫染色に影響する。

免疫染色の解説はこちら

脱灰中の5つの要点

脱灰を適切に行うために次の５つに注意する必要があります。

• ❶脱灰液の量
  • 組織体積の100倍以上
  • 1日に1~2回新しい液に交換(濃度は一定)
• ❷脱灰液の温度
  • 温度が高いと脱灰が早いが組織障害も強い
  • 酸の脱灰は15℃前後
  • 免染などで抗原が気になる場合は低温(4℃)
  • 中性のEDTA液は30℃
• ❸脱灰する場所
  液の上層で行う(下層は脱灰能力が低下するため)

• ❹脱灰を早める方法３つ
  ・振盪
  ・撹拌
  ・超音波、マイクロ波
• ❺液が入った蓋を開けておく
  酸脱灰液を使う場合は、ガスで蓋が開かなくなるため開けておく。

脱灰後の要点３つ

• 脱灰完了の確認方法
  メスで抵抗なく切れるか、針が刺されば脱灰完了。
• 無機酸脱灰後の処理
  無機酸(塩酸、硝酸)を含む脱灰液は中和後水洗が必要。
  中和は①硫酸ナトリウム②硫酸リチウム③ミョウバンを使う。

• 有機酸脱灰後の処理
  有機酸(ギ酸、トリクロロ酢酸)を含む脱灰液は70%エタノールで洗う。

脱灰液の中和、水洗まとめ

中和が必要な脱灰液のゴロ

【中和した貝に塩酸をかけるプランの少佐】

• 仲介者と和解（中和が必要な脱灰液）
• 塩酸（塩酸）
• プラスチック（プランクリクロ）
• 少佐（硝酸）

その他99個のゴロはこちら

すぐに使える病理のゴロ100個

名前だけ知っておきたい脱灰法

脱灰法には①酸②EDTA③電気④イオン交換樹脂を用いた方法があります。

今回は国試に頻出の①酸②EDTAを用いた方法を紹介しました。

残りの③電気④イオン交換樹脂に関しては名前を知っておいてください。
何かで出題される可能性もあります。