脱脂と脱灰で覚えるべき５つのポイントまとめ

ぜぶら

今回は脱脂と脱灰について。
それぞれが何なのか、そしてどうやって行うのかをポイントを絞って解説していきます。

この記事の著者

どっとぜぶら

細胞検査士
臨床検査技師
医学博士

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・細胞検査士試験 １発合格
・12月からの勉強でMT国試150点

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テーマは【勉強ができない人はいない。やり方次第で誰でもできる！】
細胞診過去問解説集や病理の国試解説集を出しました。

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脱脂は脂肪を除去する作業

パラフィン浸透までの過程でアルコールやキシレンを通すため、微量な脂質は除去され問題となりません。

それでは除去できないくらい脂肪を多く含むものが存在します。

このような組織に対して脱脂を行います。

脱脂で覚えること２つ

脱脂の操作では以下の２つを覚える必要があります。

1. どのタイミングで行うか
2. 何を使って行うか

❶脱脂は固定、切り出し後、脱灰前に行う

脱脂に使われる試薬５つ

これらを混合して使うこともあります。

標本作製過程でエタノールやキシレンを使用するため、すべての検体で少し脱脂されます。

脱灰とは沈着したカルシウムを除去すること

骨や歯などはカルシウムが沈着し、石灰化と呼ばれる現象で硬くなります。

石灰化の詳細はこちら

学校の先生にこう聞いてみ？「 骨 は鉄筋コンクリート建築と同じって知ってました？」骨の構造

疾患でも石灰化を起こすものがあります。
腫瘍で見られる石灰化物は砂粒体とも呼ばれます。

組織を観察するためには薄切をする必要がありますが、硬い組織は軟らかくしないと薄切できません。
薄切のイラスト解説はこちら

石灰化物からカルシウムを除去して軟らかくする作業が脱灰です。

脱灰で覚えること５つ

1. 脱灰のタイミング
2. 酸脱灰液の種類と特徴
3. EDTA液の特徴
4. 脱灰の影響
5. 脱灰中と後の注意点

①脱灰のタイミング

脱灰をする前に十分な固定と十分な脱脂が必要です。
そのため固定・脱脂の後に脱灰を行います。

６種類の脱灰液

1. 酸脱灰液
   • 無機酸
     • 塩酸
     • 硝酸
   • 有機酸
     • ギ酸
     • トリクロロ酢酸
   • 迅速脱灰
     • プランクリクロ
       （塩酸＋ギ酸＋塩化アルミニウム）
2. EDTA液

５つの酸脱灰液

酸脱灰液は５種類あり、無機酸、有機酸、迅速脱灰の３つに大別できる。

ぜぶら

それぞれに含まれる液と特徴を覚えよう！

エチレンジアミン四酢酸液(EDTA液)

EDTAとは？

EDTAは以下の２種類がある。

1. EDTA・２Na
   アンモニア水 or 水酸化ナトリウムを含む
2. EDTA・４Na
   塩酸 or クエン酸を含む

脱灰は組織の構造、染色、免疫染色に悪影響

脱灰は酸などを使うため脱灰が長い(強力)と組織に悪影響を及ぼします。

❶染色性の変化する

HE染色では以下の２つの変化が生じる。

1. 核のヘマトキシリンが染色低下
2. 細胞質のエオジンが濃染

組織が膨化する

組織が膨化したり溶解したりする。

抗原性が減弱する

脱灰によって抗原性が減弱するため免疫染色に影響する。

免疫染色の解説はこちら

脱灰中の5つの要点

脱灰を適切に行うために次の５つに注意する必要があります。

• ❶脱灰液の量
  • 組織体積の100倍以上
  • 1日に1~2回新しい液に交換(濃度は一定)
• ❷脱灰液の温度
  • 温度が高いと脱灰が早いが組織障害も強い
  • 酸の脱灰は15℃前後
  • 免染などで抗原が気になる場合は低温(4℃)
  • 中性のEDTA液は30℃
• ❸脱灰する場所
  液の上層で行う(下層は脱灰能力が低下するため)

• ❹脱灰を早める方法３つ
  ・振盪
  ・撹拌
  ・超音波、マイクロ波
• ❺液が入った蓋を開けておく
  酸脱灰液を使う場合は、ガスで蓋が開かなくなるため開けておく。

脱灰後の要点３つ

• 脱灰完了の確認方法
  メスで抵抗なく切れるか、針が刺されば脱灰完了。
• 無機酸脱灰後の処理
  無機酸(塩酸、硝酸)を含む脱灰液は中和後水洗が必要。
  中和は①硫酸ナトリウム②硫酸リチウム③ミョウバンを使う。

• 有機酸脱灰後の処理
  有機酸(ギ酸、トリクロロ酢酸)を含む脱灰液は70%エタノールで洗う。

脱灰液の中和、水洗まとめ

中和が必要な脱灰液のゴロ

【中和した貝に塩酸をかけるプランの少佐】

• 仲介者と和解（中和が必要な脱灰液）
• 塩酸（塩酸）
• プラスチック（プランクリクロ）
• 少佐（硝酸）

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名前だけ知っておきたい脱灰法

脱灰法には①酸②EDTA③電気④イオン交換樹脂を用いた方法があります。

今回は国試に頻出の①酸②EDTAを用いた方法を紹介しました。

残りの③電気④イオン交換樹脂に関しては名前を知っておいてください。
何かで出題される可能性もあります。