【核酸の染色まとめ】❶フォイルゲン反応❷メチル緑・ピロニン染色❸ブリリアント・クレシル青染色❹X染色質染色❺マン染色

核酸とはDNAやRNAのことです。
DNAやRNAを特異的に染め出すことで、特定の疾患の鑑別などができます。

また、核小体やX染色質といった特定の核酸を検出する染色法もあります。

臨床検査技師国家試験では前者２つ、細胞検査士試験では後者も合わせた全ての染色をマスターしましょう。

この記事の著者

どっとぜぶら

細胞検査士
臨床検査技師
医学博士

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核酸の染色５種類

ヘマトキシリンはHE染色で解説したのでここでは割愛します。

❶フォイルゲン反応

フォイルゲン反応（Feulgen reaction）は塩酸とシッフ試薬を使ってDNAを染める方法です。
この染色の最大のポイントはDNAを定量できる点です。

フォイルゲン反応の全体像

特に重要な点は赤文字にしています。
(水洗は省略)

1. 脱パラ・脱キシ・親水
2. 1N(1M)塩酸【加温：60℃】
   (加水分解)
3. 1N塩酸
   (洗浄)
4. シッフ試薬
   (呈色)
5. 亜硫酸水
   (洗浄)
6. 脱水・透徹・封入

フォイルゲン反応はDNAを染色・定量する

フォイルゲン反応はDNA（核）を染めます。

さらにこの染色の利点は染色強度がDNA量と比例することです。
つまりDNA量を色で定量できます。

フォイルゲン反応の原理

フォイルゲン反応の原理はPAS反応とよく似ています。

PAS染色と似た原理は全部で５種類あります。
試験にも出題されているので必ず覚えておきましょう。

シッフ試薬の組成も頻出なので確実に覚えましょう。

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❷メチル緑・ピロニン染色

メチル緑・ピロニン(methyl green pyronin)染色は塩基性色素であるメチル緑でDNA、ピロニンでRNA(核小体や粗面小胞体)を染める染色です。

メチル緑という名前ですが、この色素の染色結果はほぼ青色である点は注意。

また、別名「ウンナ・パッペンハイム染色」とも呼ばれ、パッペンハイム染色（ギムザ染色）と混同させる問題が出題されます。

phが重要でpH4.2の酢酸緩衝液を使いますが、高い時と低い時は以下のような影響があります。

• pHが高い時：メチル緑に染まりやすい
• pHが低い時：ピロニンに染まりやすい

メチル緑・ピロニン は形質細胞の検出に有効

形質細胞は抗体(免疫グロブリン)を作るB細胞性リンパ球です。

形質細胞の細胞質はRNA(粗面小胞体)が豊富で、核にはDNAが豊富に含まれています。

そのため、核(DNA)はメチル緑で青く染まり、RNAが多い細胞質はピロニンで赤く染まります。

このように特徴的な染まり方をするため、形質細胞や形質細胞由来の腫瘍などの検出に有効です。

メチル緑・ピロニンが有用な疾患

形質細胞に有効なため、形質細胞が腫瘍化した多発性骨髄腫(形質細胞腫)に有効です。

❸ブリリアント・クレシル青染色

ブリリアント・クレシル青(brilliant-cresyl-blue)染色は核小体を青く染める染色です。
超生体染色と呼ばれる方法の１つで、未固定の生きた細胞を染める。

❹X染色質染色

X染色質(X-chromatin)染色はその名の通り、X染色質を染める染色法です。

X染色体は2本（ヒトにおける女性の染色体）以上ある場合、1本が不活性化しています。

この現象はライオ二ゼーションと呼ばれ、凝縮して不活性化したX染色体は
【X染色質】【Xクロマチン】【バー小体】
などと呼ばれます。

このX染色質は塩基性色素のクレシル紫で染めることができます。
X染色質は核膜に接して存在しているのが特徴的です。

X染色体の数によってX染色質の違いがあります。

• X1つ（正常男性）
  45, XY
  X染色質：０
• X1つ（ターナー症候群）
  45, XO
  X染色質：０
• X2つ（正常女性）
  46, XX
  X染色質：１
• X２つ（クラインフェルター症候群）
  47, XXY
  X染色質：１
• X３つ（トリプルX）
  47, XXX
  X染色質：2

❺マン染色

マン(mann)染色は核小体を赤、クロマチンを青紫に染める染色です。

核小体はエオジン、クロマチンはメチル青で染めます。

核酸の染色に関する練習問題

問１
フォイルゲン反応の最大の特徴は何？

A.DNA量を定量的に評価できる。
B.メチル緑とピロニンという2種類の色素を使用する。
C.生きた細胞を染色する超生体染色である。
D.RNAを特異的に赤く染色する。

問２
メチル緑・ピロニン染色における形質細胞の染まり方は？

A.核が赤色に、細胞質が青色に染まる。
B.細胞全体が均一に赤色に染まる。
C.細胞全体が均一に青色に染まる。
D.核が青色に、細胞質が赤色に染まる。

問３
超生体染色に分類されるものはどれ。

A.ブリリアント・クレシル青染色
B.メチル緑・ピロニン染色
C.フォイルゲン反応
D.X染色質染色