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染色・顕微鏡
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【クリューバー・バレラ染色】染色対象・色・厚さ・加温・対象疾患など試験に必要な5つのポイントを解説!

どっとぜぶら
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クリューバー・バレラ(Klüver-Barrera )染色は髄鞘とニッスル小体・細胞体を染める染色です。

髄鞘の有無が分かるため、髄鞘が消失する脱髄性疾患に有用です。

その他にも標本作製や色素などに関する5つのポイントがあります。
どれも試験によく出る重要ポイントなので確実に覚えていきましょう!

クリューバー・バレラのポイントまとめ!
  1. 髄鞘とニッスル小体を染める
  2. 髄鞘はルクソール・ファスト青、ニッスル小体はクレシル紫で染める
  3. 染色時に加温する
  4. 切片は厚めに切る
  5. 脱髄や神経変性など中枢神経系の病変や構造変化を評価する

この記事の著者

どっとぜぶら
どっとぜぶら
細胞検査士
臨床検査技師
医学博士
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・細胞検査士試験 1発合格
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少しでも多くのMT, CT学習者の役に立ちたいと思いSNSなどで情報発信中。
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細胞診過去問解説集や病理の国試解説集を出しました。

クリューバー・バレラ染色は髄鞘とニッスル小体を染める

クリューバー・バレラ染色の組織像 髄鞘は青、ニッスル小体と細胞核は紫に染まっている
クリューバー・バレラ染色の組織像 髄鞘は青、ニッスル小体と細胞核は紫に染まっている

クリューバー・バレラ染色は1つの切片上で神経細胞の髄鞘とニッスル小体を同時に染めることが目的です。

髄鞘とニッスル小体とは?

【髄鞘】

神経細胞の軸索を何重にも取り囲む脂質に富んだ膜構造。
電気信号の伝導を速くし、軸索を絶縁・保護する役割を持つ。

中枢神経ではオリゴデンドロサイト、末梢神経ではシュワン細胞によって形成される。

髄鞘のイラスト解説はこちら

【ニッスル小体】

神経細胞の細胞体や樹状突起に見られる、粗面小胞体とリボソームが集まった顆粒状の構造。

タンパク質合成が盛んな神経細胞に特徴的で、塩基性色素(クレシル紫、チオニン、トルイジンブルーなど)で染色され、光学顕微鏡で観察できる。

クリューバー・バレラ染色はルクソール・ファスト青とクレシル紫を使う

クリューバー・バレラ染色では2つの色素が使われます。

クリューバー・バレラで使う2つの色素
  1. ルクソール・ファスト青
    髄鞘を染める色素。染色原理はよくわかっていない。
  2. クレシル紫
    主にニッスル小体を染める色素で他に核や核小体も染める。
    塩基性色素に分類される。
    クレシル紫単体の染色はこちら
クリューバー・バレラ染色で染まる神経細胞の構造と色を示したイラスト
番号の構造が、右に書いた色素で染まる

クリューバー・バレラ染色は加温する

クリューバー・バレラ染色で使う2つの色素は加温しながら染色します。

色素を使う温度
  1. ルクソール・ファスト青
    56℃
  2. クレシル紫
    37℃

加温する染色のまとめとゴロはこちら

  1. 切片を厚めに切る
    (5~10µm)
  2. 脱パラ・脱キシ
  3. ルクソール・ファスト青【56℃加温】
  4. 95%エタノール
    (洗浄)
  5. 0.05%炭酸リチウム
    (分別)
  6. 70%エタノール
    (分別)
  7. 蒸留水
    (分別停止)
  8. 0.1%クレシル紫【37℃加温】
    (染色)
  9. 95%エタノール
    (分別)
  10. 脱水・透徹・封入
クリューバー・バレラ染色の手順と、加温する2つの色素の温度
番号の順に進む。青い所が前半、紫の所が後半

クリューバー・バレラ染色は切片を厚めに切る

クリューバー・バレラ染色は5~10µmで薄切します。
※通常の切片は3~4µm

ぜぶら
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【神経系の染色は厚めに切る】と覚えておこう!
ほかの神経系の染色と色素や加温を見比べられます。
神経系の染色まとめはこちら

薄切の知識もここで全て手に入る!
【薄切】目的・ミクロトームの種類・不良切片の原因をイラスト解説
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クリューバー・バレラ染色で脱髄性疾患が分かる

髄鞘を染めることができるため、脱髄が見られる脱髄性疾患が分かります。

脱髄とは?

神経線維を取り囲む髄鞘が障害・破壊されること。
脱髄が生じる疾患を脱髄性疾患と呼ぶ。

脱髄が生じると、神経の電気信号の伝導が遅くなったり、うまく伝わらなくなり、さまざまな神経症状が現れる。

脱髄性疾患

脱髄性疾患には以下のようなものがあります。

  1. 多発性硬化症
    中枢神経系に多発性の脱髄病変が生じる。
  2. ギラン・バレー症候群
    末梢神経が障害される自己免疫性疾患。
    脱髄によるものと軸索が障害されるものの2種類がある。
  3. 進行性多巣性白質脳症
    JCウイルス(ポリオーマウイルスの1種)による脱髄性疾患。
クリューバー・バレラ染色の正常な脊髄の横断像。中央の蝶の形の灰白質は淡い紫で前角に大きな紫の神経細胞が点在し、その周りを髄鞘の多い白質が濃い青で囲む
正常の脊髄。髄鞘の多い白質は濃い青
クリューバー・バレラ染色の大脳白質。濃い青の白質の中に、境界のはっきりした青の抜けた淡い脱髄斑があり、斑の中には紫の核が散らばる
大脳白質の脱髄斑。髄鞘がなくなった所は青が抜ける

クリューバー・バレラ染色に関連する過去問

ぜぶら
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最後に過去問を解いて知識を定着させよう!

問題66A46

小脳のKlüver-Barrera染色標本を次に示す。
矢印で示すのはどれか。

  1. 砂粒体
  2. Nissl小体
  3. Russel小体
  4. Mallory小体
  5. アミロイド小体
66AM46厚生労働省ホームページ第66回臨床検査技師国家試験の問題および正答について午前問題別冊
出典:厚生労働省ホームページ第66回臨床検査技師国家試験の問題および正答について午前問題別冊
Q
答えはここをクリック

答え:2

【解説】

矢印がさす細胞は神経細胞の細胞体。
中央に黒紫に染まる核小体があり、その周りの白く抜けている部分が核、さらにその周りの顆粒状の紫色部分が細胞質です。

  1. 砂粒体はカルシウムが主成分の石灰化物のこと。卵巣、子宮内膜の漿液性癌や甲状腺乳頭癌などで見られる。カルシウムを含むためコッサ反応が有用である。
    コッサ反応の解説はこちら
  2. この記事でも解説したように、クリューバー・バレラ染色はNissl小体が染まるため正解。
  3. Russell小体は形質細胞の細胞質内に蓄積した免疫グロブリンの塊。反応性・腫瘍性のいずれの形質細胞でもみられる。PAS反応に陽性を示す。
  4. Mallory小体はアルコール性肝炎や肝細胞癌などで肝細胞の細胞質に見られる中間径フィラメントからなる小体。HE染色で好酸性に染まる。関連する特殊染色はあまり聞かない。
  5. アミロイド小体(類でんぷん小体)は、高齢者の脳などで見られる丸い小体。名前にアミロイドと付くが、主な成分は糖がつながったもの(ポリグルコサン)で、アミロイドーシスのアミロイドとは別物。PAS反応に陽性を示す。
    アミロイド染色の詳細な解説はこちら

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