今回は4つの脂肪染色 について。
脂肪染色はひっかけ的要素もあり問題にしやすい。
ポイントをおさえて1点アップ!
脂肪染色の種類と共通点
覚える脂肪染色は4種類です。
- Sudan Ⅲ
- Oil red O
- Sudan black B
- Nile blue
Nile blue以外は4つの共通点があります。
- 無極性色素
- 厚めの凍結切片を使う
- 染色工程にアルコールを含む
- 加温する
これを踏まえたうえで4種類のポイントをおさえていきましょう。
SudanⅢ染色
ポイントは7つ。
- クリオスタットで厚めに切る
- 加温する
- 色素が無極性色素
- 物理的に染まる
- 染色工程にアルコールを含む
- 中性脂肪が赤く染まる
- 親水性封入剤で封入する
SudanⅢ①クリオスタットで厚めに切る
パラフィンブロックでは脂肪が溶けるため検出できません。
基本的には生の組織からクリオスタットで切片を作製します。
(ホルマリン固定組織からでも可能です)
この切片のことを凍結切片とも呼びます。
SudanⅢ②加温する
加温する染色は10種類。
- 脂肪染色
- 神経系染色
- Feulgen 反応
- Masson-Fontana 染色
- ヘルマンヘレルストローム
- DOPA反応
- Grimelius染色
- Warthin-Starry染色
- PAM反応
- Grocott染色
SudanⅢ③色素が無極性色素
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-967x1024.png)
脂肪染色の色素はほとんど無極性。
この色素の特徴として
- 水に溶けにくい
- アルコールに溶けやすい
- 荷電しない
の3つを覚えておきましょう。
SudanⅢ④物理的に染まる
多くの染色は化学的な結合で色を付けます。
例えば塩基性色素は陽性荷電なため陰性荷電とくっ付きます。
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-1.png)
Sudan Ⅲなどの脂肪染色色素は目的物質に物理的な結合をします。
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-2-1024x423.png)
SudanⅢ⑤染色工程にアルコールを含む
Sudan Ⅲはアルコールが好き。
でも脂肪はもっと好き。
脂肪を見つけると色素は溶けてたアルコールから脂肪に移動します。
脂肪はアルコールに溶けるため工程にアルコールを含まないと思われがちだが、使われているので注意。
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-3-1024x836.png)
SudanⅢ⑥中性脂肪が赤く染まる
脂肪染色はいくつかありますが、それぞれ染めるものや色が違います。
SudanⅢ染色は
中性脂肪を赤く染める
ことを覚えておきましょう。
SudanⅢ⑦親水性封入剤で封入
非水溶性封入剤は脂肪を溶かします。
そのため水溶性封入剤で封入します。
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-4.png)
Oil red O染色
次は Oil red O染色について。
SudanⅢ染色とほぼ同じだから違うところだけおぼえよう!
Oil red O染色染色のポイントは次の7つ。
- クリオスタットで厚めに切る
- 加温する
- 色素が無極性色素
- 物理的に染まる
- 染色工程にアルコールを含む
- 中性脂肪が赤く染まる
- 親水性封入剤で封入する
SudanⅢ染色とほぼ同じ。
ただ色素以外で一か所違うところがあります。
アルコールの種類です。
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-5-1024x690.png)
微妙な違いですが出る可能性もあります。
頭の片隅に置いておきましょう。
Oil red O染色①イソプロを使う理由
イソプロピルアルコールは2つの効果があります
- 色素の溶解性
- 脂肪への浸透性を高める
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-6-1024x939.png)
結果、中性脂肪が赤色に染まりやすくなります。
何故 SudanⅢ染色に使わないのかは分かりません。
色素との相性があるのかもしれませんね。
Sudan black B 染色
基本的なポイントはSudanⅢ染色やOil red O染色と同じです。
異なる点は染めるものと色です。
今回の ズダン黒B は下表の8番が違います。
赤ではなく、黒く染まります。
名前に “黒” が入っているのでそのまま覚えましょう。
しかもSudanⅢやOil red Oより多くの脂質を染めることができます。
- 色素は無極性色素
- 化学的ではなく、物理的に染まる
- 切片を厚めに切る
- 凍結切片を使用する
- 染色工程にアルコールを用いる
- 加温する
- 親水性封入剤で封入
- 中性脂肪を赤く染める
- 色素は無極性色素
- 化学的ではなく、物理的に染まる
- 切片を厚めに切る
- 凍結切片を使用する
- 染色工程にアルコールを用いる
- 加温する
- 親水性封入剤で封入
- 様々な脂質を黒く染める
・中性脂肪
・リン脂質
・脂肪酸
・コレステリン
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-7-1024x785.png)
Nile blue染色
ポイントは次の6つ。
- 色素は無極性色素
- 化学的ではなく、物理的に染まる
- 切片を厚めに切る
- 凍結切片を使用する
- 親水性封入剤で封入
- リン脂質と脂肪酸を青に染める
中性脂肪とコレステリンエステルを赤く染める
ナイル青染色には以下の2つの色素が入っていると考えられています。
そしてそれぞれ染めるものが違います。
- ナイル青
リン脂質と脂肪酸を染める - ナイル赤
中性脂肪とコレステリンエステルを染める
![](https://nonbiri-english.com/wp-content/uploads/2023/01/image-8-1024x915.png)
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